细胞涂片离心机 细胞涂片离心机的用途

细胞核为什么在离心机中沉降?

洗涤：为经过处理的粗制液中发生亲和沉淀可能会发生非特异性结合，尤其是使用带电的聚合物，离子交换的效应将使其他蛋白质共同沉淀，因此在分离目的物之前要洗涤沉淀物。其做法是：加入适当的清洗剂重新溶解沉淀，配基-载体复合物与目的蛋白质的分离：分离结束之后，要确保回收目的蛋白质和配基-载体复合物，目的蛋白质要达到一定的纯度，回收率要高。再沉淀；或在专一性洗脱之前，清洗沉淀。在上述过程中要始终保持目的蛋白质与配基处于亲和结合状态。

细胞核沉降系数大，首先是低速离心离心泵是用来从一个地点输送液体（或者混合物，废水，废料）到另一个地方用的。，分离出细胞核；线粒体沉降系数小，然后是高速离心，分离出线粒体。

细胞涂片离心机 细胞涂片离心机的用途

速离心法是利用样品中各种组分的沉降系数不同而进行分离的方法，主要根据颗粒大小和密度的不同存在的沉降速度别，分级增加离心力，从试样中依次分离出不同组分的方法。通常两个组分的沉降系数在10倍以上时可以用此法分离。例如某样品中有大、小组分，用速离心法分离时，把样品放在离心管内，先按大组分的沉降系数选择离心转速和离心时间，当离心结束时正好使大组分全部沉降到离心管底部。

细胞核沉降系数大，所以先分离细胞核。

液基细胞学检查的方法和所需设备

综上所述，实验室摇床和离心机的应用场景和作原理有所不同，因此在实验室中的用途也不同。

液基细胞学检查方法目前国内有两种技术，一是膜式制片发，二是离心式制片法。这两种方法取材是一样的，是用一种特殊的宫颈取材刷，取好宫颈脱落细胞后都存放在保存液内。然后送病理科制片。前者只需问题一：离心机是用来做什么的？ 离心机是利用离心力，分离液体与固体颗粒或液体与液体中各组分的机械。离心机主要用于将悬浮液中的固体颗粒与液体分开，或将乳浊液中两种密度不同，又互不相溶的液体分开（例如从牛奶中分离出奶油）；它也可用于排除湿固体中的液体，例如用洗衣机甩干湿衣服；特殊的超速管式分离机还可分离不同密度的气体混合物；利用不同密度或粒度的固体颗粒在液体中沉降速度不同的特点，有的沉降离心机还可对固体颗粒按密度或粒度进行分级。一台自动液基细胞制片机一部完成，后者需要2、样本质量：离心转速过高会使样本受到剧烈的离心力，导致样本的质量受到影响，如蛋白质的结构可能会发生改变，细胞的形态和结构也可能会受到破坏。、离心机和制片机完成。

离心机是干什么用的

A、自由扩散 B、主动运输 C、协助扩散 D、逆浓度梯度运输

问题二：为什么医院里有离心机? 是干什么用的? 1．用于分离混悬的颗粒

1)如用提取体液中某些成分。

1)分离血液中的有形成分，浓缩体液中细胞或其他有形成分，作分析测定用

2)分离与蛋白结合或抗体结合的配体及游离配体等。

3)分离标本中已经沉淀的蛋白质。

2．分离两种不同密度互不相溶的液体

问题三：离心机和离心问题四：高速离心机的作用是什么 高速离心机有什么作用 高速离心机就是转速极高，产生的离心力极大，能够将比重小的固液分离开，从而回收需要的固体或者液体。泵有什么区别 都是干什么用的 离心机一般鸡用来分类液体中不同密度的液体，物质。

问题五：冷冻离心机做什么用 冷冻离心机主要是针对在高速离心的时候，防止有些离心物质（如蛋白质等）会在高温下产生质变，转速一般不超过4000rpm，容量为2―4L，是实验室最常用于大量初级分离提取生物大分子、沉淀物等。其转头多用铝合金制的甩平式和角式两种，离心管有硬质玻璃、聚乙烯硬塑料和不锈钢管多种型号。离心机装配有驱动电机、定时器、调整器（速度指示）和制冷系统（温度可调范围为-20―+40℃），可根据离心物质所需，更换不同容量和不同型号转速的转头。

动物细胞融合，用鸡血做材料做实验要那些材料，试剂，仪器，和注意事项

因此，在提取某一种酶时，首先应当根据需要，选择含此酶最丰富酶液的净置：加完硫酸铵后，酶液要静置一段时间，使酶蛋白完全沉淀下来，酶静置后，就不要再加以搅拌。的材料，如胰是提取胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、淀粉酶和脂酶的好材料。由于从动物内或植物果实中提取酶制剂受到原料的限制，如不能综合利用，成本又很大。目前工业上大多采用培养微生物的方法来获得大量的酶制剂。从微生物中来生产酶制剂的优点有很多，既不受气候地理条件限制，而且动植物体内酶大都可以在微生物中找到，微生物繁殖快，产酶量又丰富，还可以通过选育菌种来提高产量3、时间：离心时间也会影响样本的分离效果和质量，离心时间过长可能会导致样本的氧化和降解。，用廉价原料可以大量生产。

分离各种细胞器所需的相对离心力与哪些因素有关?

5、(2006广东高考)夏季高(2)植物吸收矿质元素的主要方式是 ，这一观点可通过 两装置的实验加以验证。温时段，用较低温度的地下然后可以根据你实验的需要做进一步处理（加入培养基继续培养，加入抗体标记，加入冻存液进行冻存等等）水灌溉，容易导致农作物萎蔫。其主要原因是( )

与细胞器的大小和密度等因素有关。分离各种细胞器所需的相对离心力与细胞器的大小和密度，离心机的转速和转子，离心液的密度等有关。离心法是生物学和生物化学研究中常用的一种分离和纯化细胞器和分子的方法。

如图所示，用高速离心机分离血清和细胞。请回答下列问题：(1)图中所示装置可用来分离的物质是；

pH的控制：应从酶的溶解度与稳定性两个方面考虑，在酶等电点时其溶解度最小易沉淀，但有些酶再等电点时稳定性较，因此要选择pH值.一般要求在酶最稳定的pH值的前提下再考虑最适宜酶沉淀的pH值。在作中一旦确定pH值后，在添加硫酸铵之前甲酸或碱调节好酶液的pH值，要尽量避免溶液pH值的波动以免破坏酶的稳定性。在添加硫酸铵时要注意搅拌，并注意硫酸铵的加入速度，一般是由少到多，缓慢加入，硫酸铵尽可能磨成细粉。

(四)影响物质运输速度的曲线分析

离心机则用于分离混合物中不同密度的物质。它利用离心力的原理，将液体样品分离成不同的组分。离心机通常包括一个旋转的离心轴和一个离心头，离心头可以装载样品管或离心管，当离心机旋转时，高密度的物质会沉淀到离心管底部，而低密度的物质则会浮到离心管顶部。离心机通常用于分离血浆，细胞，和蛋白质等生物样品。

1、物质浓度(在一定浓度范围内)对运输速率的影响曲线：(1)自由扩散的运输方向是由高浓度一侧到低浓度一侧，其动力是两侧溶液的浓度，在一定浓度范围内，随物质浓度的增大，其运输速率与物质浓度成正比。(2)协助扩散或主动运输的共同点是都需要载体协助，在物质浓度较低时，随物质浓度的增大，运输速率也逐渐增大，到达一定物质浓度时，由于受膜上载体数量的限制，运输速率不再随浓度增大而增大。

2、氧气浓度对物质运输速率的影响曲线：(1)自由扩散和协助扩散统称为被动运输，其运输方向都是从高浓度一侧到低浓度一侧，其运输的动力都是浓度，不需要能量，因此与氧气浓度无关，运输速率不随氧气浓度增大而改变。(2)主动运输方式既需要载体协助又需要消耗能量。在氧气浓度为零时，通过细胞无氧呼吸供能，但无氧呼吸产生能量较少所以运输速率较低，在一定范围内随氧气浓度升高，有氧呼吸加强，产生的能量逐渐增多，所以运输速率不断加快，当氧气浓度足够高时，能量供应充足，但由于受到载体数量的限制，运输速率不再随氧气浓度增大而加快。

3、图像如下

[基础训练]1、取四株大小与长势一致的番茄幼苗，分别培养在盛有等量完全培养液的培养瓶中，然后将其中两株番茄幼苗的地上部分同时剪去。装置如图。

(3)经过一定时间后，如果甲瓶中的番茄幼苗出现了萎蔫现象，其原因(1)分析被运输的物质是否通过细胞膜；(2)明确被运输物质微粒的性质(大分子、小分子、离子)；(3)分析物质通过细胞膜的转运方向，是否需要载体协助，是否需要消耗能量。可能是

。

2、神经细胞间可以通过一种特殊的介质来传递信息，含有传递分子的囊泡与神经细胞内的质膜融合之后再打开，将传递分子释放到神经细胞之外，这属于( )

A、主动运输 B、协助扩散 C、胞吐 D、胞吞

3、实验发现，葡萄糖进入红细胞时，如果使用物限制蛋白质的活性，则葡萄糖的运输速率迅速下降，如果减少能量的供应，却对运输没有影响。由此推断葡萄糖进入红细胞的方式是( )

[高考模拟]

4、(2008广东生物2)甲、乙两种物质分别依赖自由扩散(简单扩散)和协助扩散进入细胞，如果以人工合成的无蛋白质磷脂双分子膜代替细胞膜，并维持其他条件不变，则( )

A、甲运输被促进 B、乙运输被促进 C、甲运输被抑制 D、乙运输被抑制

离心机转速对样品的影响？

也就是说，高速离心机可以分离比重较小的固液混合物。

影响主要体现在以下几个[思考感悟]要确定某种物质的运输方式，关键应该抓住那些方面？方面。

2)分离血液中的脂质成分，如分离血浆中乳糜微颗粒及各种脂蛋白等。

原代细胞培养时离心的转速一般多少

一、预处理及固液分离技术

各个不同的离心机同样的离心力下转速可能会有异。各个组织的不同细胞可能又适合不同的离心力。所以原代细胞培养时离心的转速是根据离心力来换算，具体细胞组织具体调整，正常离心的离心力是100g到200g，换算后的1、分离效果：离心转速越高，分离效果越好，可以分离出更多的细胞、蛋白质等物质。但是过高的离心转速也会造成样本的破坏和损失。转速一般是1000rpm每分钟到2000rpm每分钟，一共离心5分钟。离心细胞的效果比较好，对细胞的损伤都比较小。

【实验原理】在诱导物（如仙台，聚乙二醇）作用下，相互靠近的细胞发生凝集，随后在质膜接触处发生质膜成份的一系列变化，主要是某些化学键的断裂与重排，进而细胞质沟通，形成一个大的双核或多核细胞（此时称同核体或异核体）。 【实验目的】1．了解PEG诱导细胞融合的基本原理。2．通过PEG诱导鸡红细胞之间的融合实验，初步掌握细胞融合技术。 【仪器、材料及试剂】1．仪器：显微镜 离心机 天平 离心管 注射器 细滴管 载片、盖片。2．材料：一龄公鸡静脉血3．试剂：Alsr溶液、GKN溶液、0.85%生理盐水、50%PEG溶液、双蒸水。 附试剂的配配制：①Alsr溶液：葡萄糖 2.05g，柠檬酸钠0.80g，NaCl 0.42g，溶于100ml双蒸水中。 ②GKN溶液：NaCl 8g，KCl 0.4g，Na2HPO4·2H2O 1.77g，NaH2PO4.H2O 0.69g，葡萄糖 2g，酚红 0.01g，溶于1000ml双蒸水中。③0.85%生理盐水 ④50%PEG溶液：称取一定量的PEG（WM=4000）放入烧杯中，沸水浴加热，使之熔化，待冷却至50℃时，加入等体积预热至50℃的GKN溶液，混匀，置37℃备用。 【作步骤】1．在公鸡翼下静脉抽取2 ml鸡血，加入盛有8 ml的Alsver液中，使血液与Alsver液的比例达1：4，混均后可在冰箱中存放一周。2．取此贮存鸡血1ml加入4ml 0.85%生理盐水，充分混均，800rpm离心3min，弃去上清，重复上述条件离心两次。弃去上清，加GKN液4ml，离去。3．弃去上清，加GKN液，制成10%细胞悬液。4．取上述细胞悬液以血球计数器计数，用GKN液将其调整为1×106个/ ml。5．取以上细胞悬液1 ml于离心管，放入37℃水浴中预热。同时将50%PEG液一并预热20min。6．20min后将0.5ml 50%PEG溶液逐滴沿离心管壁加入到1 ml细胞悬液中，边加边摇匀，然后放入37℃水浴中保温20min。7．20 min后，加入GKN溶液至8ml，静止于水浴中20 min左右。8．800rpm离心3min，弃去上清，加GKN溶液再离心1次。9．弃去上清，加入GKN液少许，混均，取少量悬浮于载玻片上，加入Janus green染液，用牙签混均，3min盖上盖玻片，观察细胞融合情况。10．计算融合率，融合率=视野内发生融合的细胞核总数/视野内所有细胞核总数×。

生物分离高手进

(1)实验中，向甲、丙两瓶持续充入空气，测量四只培养瓶内溶液中的K+含量，请用坐标轴曲线表示甲、丁两瓶的结果(画在上框内)。

酶的分离简单，就是麻烦，时间挺长的

酶的分离纯化方法

酶的来源多为生物细胞。生物细胞内产生的总的酶量虽然是很高的，但每一种酶的含量却很低，如胰中期消化作用的水解酶种类很多，但各种酶的含量却别很大。

由于在生物组织中，除了我们所需要的某一种酶之外，往往还有许多其它酶和一般蛋白质以及其他杂质，因此为制取某酶制剂时，必须经过分纯化的手续。

酶是具有催化活性的蛋白质，蛋白质很容易变性，所以在酶的提纯过程中应避免用强酸强碱，保持在较低的温度下作。在提纯的过程中通过测实验室摇床和离心机是常见的实验室设备，它们的主要区别在于其作原理和应用场景。定酶的催化活性可以比较容易跟踪酶在分离提纯过程中的去向。酶的催化活性又可以作为选择分离纯化方法和作条件的指标，在整个酶的分离纯化过程中的每一步骤，始终要测定酶的总活力和比活力，这样才能知道经过某一步骤回收到多少酶，纯度提高了多少，从而决定着一步骤的取舍。

酶的分离纯化一般包括三个基本步骤：即抽提、纯化、结晶或制剂。首先将所需的酶从原料中引入溶液，此时不可避免地夹带着一些杂质，然后再将此酶从溶液中选择性地分离出来，或者从此溶液中选择性地除去杂质，然后制成纯化的酶制剂。下面就酶的分离纯化的常用方法作一综合介绍：

1.细胞破碎（cell disruption）

高压均质器法：此法可用于破碎酵母菌、大肠菌、假单胞菌、杆菌甚至黑曲霉菌。将细胞悬浮液在高压下通入一个孔径可调的排放孔中，菌体从高压环境转到低压环境，细胞就容易破碎。菌悬液一次通过均质器的细胞破碎率在12%-67%。细胞破碎率与细胞的种类有关。要达到90%以上的细胞破碎率，起码要将菌悬液通过均质器两次。是提高作压力，减少作次数。但有人，当作压力达到175Mpa时，破碎率可达。当压力超过70Mpa时，细胞破碎率上升较为缓慢。高压均质器的阀门是影响细胞破碎率的重要因素。丝状菌会堵塞均质器的阀门，尤其高浓度菌体时更是如此。在丰富培养基上比在合成培养基上生长的大肠菌更难破碎。

容菌酶处理法：蛋清中含有丰富的溶菌酶，价格便宜，常用来裂解细胞。具体做法是：溶壁微球菌(micrococcus lysodeikticus)43kg，置于0.5%的氯化钠溶液中，使细胞浓度为5%（干重），在35℃用0.68kg（干重）的蛋清处理20min，得到的细胞碎片用相同体积的乙醇处理，用离心机将细胞碎片和胞内蛋白质除去，再将乙醇浓度提高到75%（体积分数），可以得到纯度为5%的氢酶1500g。

2.离心

在生物领域采用的离心机系统，除了应具备离心机的一般要求外，还应满足生物生产的技术要求，这包括灭菌、冷却、密封，以保证产品不受污染并不污染环境。现代哦离心机装置包括以下三个步骤，并进行程序控制：离心、离心系统的灭菌及就地清洗。如阿法-拉伐公司离心机产品的装置，具有双重轴向密封，密封由装在转筒主轴上下的碳化硅动环和固定环组成，密封由水连续冷却和润滑，可防止产品被污染，也可防止生产过程中排出的废物对环境的污染。该离心机又如一个密闭的压力容器，可在121℃温度下进行蒸汽灭菌，该离心设备设有环绕离心机转筒的冷却夹套，对悬浮液和浓缩的固体都能进行充分的冷却，并能有效地控制温度，这对于生物制品是非常重要的。如BTPX205型离心机可用于细胞收集、培养液的净化和细胞碎片的分离，可用于、酶制剂等的提取。该机的其他辅助系统及控制系统也较为完善，如设有压力指示器、力量计、温度传感器和液面传感器。

3.膜分离技术

在蛋白质纯化过程中主要用到的膜分离技术多为超滤。在静压作用下降溶液通过孔径非常小的滤膜，使溶液中分子量较小的溶质透过薄膜，而大分子被截留于膜表面。大多数超滤膜是由一层非常薄的功能膜与较厚的支撑膜结合在一起而组成的。功能膜决定了膜的孔径，而支撑膜提供机械强度以抵抗静压力。超滤浓缩的优点是：作条件温和，无相变化，对生物活性物质没有破坏。

超滤系统主要由料液贮罐、泵问题六：冷冻离心机做什么用？ 你好，很高兴为您解答！、超滤器、透过液收集罐组成，料液经泵打入超滤器，水及低分子量物质排出超滤器外，被浓缩的料液在料液贮罐、泵、及超滤器中循环。当料液浓缩至一定的倍数后即可作为进一步处理的浓缩料液。

超滤应用于蛋白质类物质的浓缩和脱盐过程中时应注意以下问题：，在超滤循环过程中，由于泵和叶轮与料液的摩擦放热作用，料液的温度会逐渐升高，会造成蛋白质分子的损失。因此，料液贮罐应加冷却系统，并安装自动测温及控制系统。第二，某些酶的辅助因子散失为问题：一些酶含有辅助因子，其分子量小，超滤时易从透过液中排除掉，因而在超滤前或超滤后要添加一定浓度的的辅助因子。

4.泡沫分离

原理：将气体通入含多种组分的溶液中，由于这些组分的表面活性由异，因此在溶液的表面，某些组分将形成泡沫，泡沫的稳定性取决于作条件及溶液的生物学特性。泡沫中含有更多的表面活性成分，故泡沫的组分种类及其含量与溶液中的不相同。这样，溶液中的组分舅得以分离。

蛋白质较易吸附与气液界面，这有利于其结构的稳定。泡沫分离过程是：蛋白质从主体溶液中扩散到气液界面，该过程可能是可逆的也可能是不可逆的；分子发生重排，一般认为在空气-水界面会形成两种类型的膜，一种是稀膜，另一种是浓膜，可能会发生由多个分子聚集在一起的现象。在气液界面形成的蛋白质膜可以是单层的也可以是多层的。膜的类型取决于主体溶液及气液界面上蛋白质的特性、结构和浓度。

泡沫分离的目的，一方面提高酶蛋白的富集率（泡沫中蛋白质的浓度/最初溶液中蛋白质浓度），另一方面提高酶蛋白的提取率（泡沫中蛋白质的提取率/最初的蛋白质质量），或使多组分混合物中某一组分的分配系数。

沉淀

1. 盐析

常用的盐析剂是硫酸铵，其溶解度大、价格便宜。硫酸铵沉淀蛋白质的能力很强，其饱和溶液能使大多数的蛋白质沉淀下来。对酶没有破坏作用。

2．沉淀

选择：可用于酶蛋白沉淀的包括醇类物质等，如甲醇、乙醇、。乙醇的亲水性能较好，可防止蛋白质的变性，酶蛋白在其中的溶解度也较低。

3.聚合物絮凝剂沉淀

聚合物絮凝剂，如葡聚糖和聚乙二醇，与酶分子争夺水分子，具有脱水作用使酶沉淀。聚乙二醇作为一种沉淀剂的优点是在水溶液中，其浓度可达到50%，浓度为6%-12%的蛋白质大都可以沉淀下来。这种试剂不需要低温作，而且对蛋白质的稳定还有一定的保护作用。聚乙二醇不会被吸附，故在离子交换吸附前不必去除。

4．用金属离子和络合物沉淀

酶和其他蛋白质都会形成金属盐，其溶解度较低。用金属离子沉淀的缺点是酶与金属离子相互作用后，可逆变化较，尤其是用巯基衍生物，它结合的]金属离子会催化酶变性而失活。

5．用特殊试剂沉淀法

用链霉素可选择性去除，从而使胞内酶沉淀出来。链霉素盐（浓度为0.5-1.0mg/mg蛋白质）对于选择性沉淀的效果比锰离子还要好，酶不易失活。

6．亲和沉淀

将亲和反应的高度选择性、低处理量特性与沉淀作的大处理量、地选择性有机结合形成了亲和沉淀技术。将配基与可溶性载体偶联后形成载体-配基复合物，该复合物与生物分子结合后在一定条件下可以沉淀出来。

配基-载体复合物可以选择性地与蛋白质结合，溶液中的pH值、离子强度及蛋白质浓度等条件对亲和结合的影响力并不大，只有竞争性的配基会降低产物与原配基的亲和结合力，甚至使亲和结合发生逆转。

产生沉淀的方法有：离子交联；加入带相反电荷的聚合物；加入带相反电荷的疏水基团；改变pH值，诱导产生疏水沉淀；温度诱导产生沉淀。

亲和结合：将亲和配基加入到含有目的物蛋白质的溶液中，调节好有关沉淀的条件，使之有利于亲和结合。